特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
Inosine 肌苷58-63-920mg
Manganese(II)chloride,anhydrous 无水化锰100g瓶人单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
48孔培养板100块/箱块小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
链霉亲和素-FITC0.1ml支大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Glycerol Kinase 甘油激酶1KU瓶人凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
尼龙筛网(1m×1m)500目包鸭子碳酸酐酶(CA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
结晶紫染色液(0.1%)500ml瓶人α乳清蛋白(α-La)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rifampicin 利福平250mg支兔血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔抗羊IgG-RBITC5ml支大鼠角化细胞***因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Vanillin 香兰素-香草醛121-33-520mg人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Brassinolide 24-表油菜素内酯-芸苔素内酯72962-43-720mg小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Resveratrol 白藜芦醇5g瓶禽脑脊髓炎(AE)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
类天花病毒PCR检测试剂盒磷酸化氨基末端激酶1/2/3抗体 规格: 0.1ml 英文名称: phospho-JNK1 + 2 + 3 (Thr183+Tyr185)
磷酸化KLF5抗体 规格: 0.1ml 英文名称: phospho-KLF5(Ser275)
神经细胞钾氯离子转运蛋白抗体 规格: 0.1ml 英文名称: KCC2
组蛋白H3赖氨酸9甲基化1C抗体 规格: 0.2ml 英文名称: KMT1C
β内酰胺酶样蛋白2抗体 规格: 0.2ml 英文名称: LACTB2
长寿相关基因lASS5抗体 规格: 0.2ml 英文名称: LASS5
脑特异性磷脂酸磷酸酶样蛋白1抗体 规格: 0.2ml 英文名称: LPPR4
酪氨酸磷酸酶受体相互作用蛋白Liprin α1抗体 规格: 0.2ml 英文名称: Liprin alpha 1
毒蕈碱样蛋白3抗体 规格: 0.2ml 英文名称: MBNL3
基质金属蛋白酶18/19 规格: 0.2ml 英文名称: MMP19
少突胶质细胞髓鞘相关蛋白抗体 规格: 0.2ml 英文名称: MOBP