使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
|
产品名称
|
规格
|
货号
|
|
回归热疏螺旋体PCR检测试剂盒
|
50T
|
GOY-M0163
|
特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
两性电解质pH3-10 40%12ml瓶人美丽线虫凋亡基因(CED-3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Amentoflavone 穗花杉双黄酮1617-53-420mg小鼠幽门螺旋IgG(Hp-IgG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔抗马IgG（血清）5ml支人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
001×7强酸性乙烯系阳离子交换树脂500g瓶山羊促生长释放(GHRH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Fluconazole 氟康唑1g瓶大鼠过氧化氢酶(CAT)ELISA 试剂盒48T/96T试剂盒 组装/原装
MOPS 3-(N-啡啉)丙磺酸25g瓶人抗肝肾微粒体抗体(LKM)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Florfenicol 氟苯尼考1g瓶小鼠胚胎干细胞系MESPU30(M30)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Nomilin 诺米林1063-77-020mg牛白介素4(IL-4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Brdu 5-溴-2'-脱氧尿苷1g瓶人血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
0.2mlPCR管(平盖)，10盒/箱1000支盒大鼠5-羟色胺受体蛋白1B（5-HT1BR）ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Catalpol 梓醇2415-24-920mg人刚地弓形虫(T.gondii)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
无粉一次性PVC手套 (50双/盒)小号盒小鼠对氨基苯甲酸(PABA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
回归热疏螺旋体PCR检测试剂盒膜相关的蛋白质HEM2抗体 规格： 0.2ml 英文名称： NCKAP1
阳离子转运器1抗体 规格： 0.1ml 英文名称： 42278
嘌呤ATP受体抗体 规格： 0.2ml 英文名称： P2Y2
磷酸化肿瘤抑制基因P53抗体 规格： 0.1ml 英文名称： phospho-P53(Ser315)
钙粘蛋白21抗体 规格： 0.1ml 英文名称： PCDH21
孤儿核受体PAR1抗体 规格： 0.2ml 英文名称： PXR
过氧化还原酶3抗体 规格： 0.1ml 英文名称： PRDX3
过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α+β抗体 规格： 0.1ml 英文名称： PGC1 alpha + beta
磷酸化帕金蛋白抗体 规格： 0.1ml 英文名称： phospho-PARK2(Ser101)
蛋白激酶样内质网激酶抗体 规格： 0.1ml 英文名称： PERK
蛋白酶调解因子9抗体 规格： 0.2ml 英文名称： PSMD9