细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备F-12K培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜?；灰翰⒓觳橄赴芏?。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

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冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

实验事项：

1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。

2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。

3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。

4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。

5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。

6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。

7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。

 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

质量规格：粒径0.490.69mmSodiumoleate,≥99%

质量规格：分析标准品，用于萜分析，≥99.5%(GC)Sodiumamide,95%

质量规格：分析标准品Sodiumhydrogendifluoride,98%

质量规格：分析标准品4Aminobenzoicacidsodiumsalt,≥99%

质量规格：分析标准品,≥99.7%(GCSodiumdodecylbenzenesulfonate

质量规格：分析标准品Sodiumstearate,≥99%

质量规格：分析标准品,98.5%Sodiumphenolate,99%

质量规格：分析标准品Sodiumbenzenesulfonate,97%

质量规格：分析标准品Sodiumsalicylate,≥99.5%

质量规格：0.100mg/mlSodiummalonate,≥97.0%

质量规格：分析标准品,95%Sodiumpropionate,≥99.0%

质量规格：100μg/ml,u=4%Sodiumoxalate,≥99%

质量规格：10μg/ml,u=7%Sodiumhexafluoroaluminate

质量规格：分析标准品Sodiumfluorosilicate

质量规格：100μg/ml,u=2%Sodiummetasilicatenonahydrate,≥98%

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DECTIN 2  C型凝集素结构域家族6成员A抗体 规格: 0.1ml

Kazrin  Kazrin蛋白抗体 规格: 0.2ml

ANKRD1/CARP  心肌锚蛋白重复结构域1抗体 规格: 0.2ml

Insulin Receptor alpha  胰岛素受体α抗体 规格: 0.1ml

CNTFR-α  睫状神经营养因子受体α抗体 规格: 0.1ml

8-OHdG  8-羟基脱氧鸟苷抗体 0.1ml

Goat Anti-Mouse IgG/Bio  生物素标记的羊抗小鼠IgG 规格: 0.1ml

NRXN3  轴突蛋白3抗体 规格: 0.1ml

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