细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备F-12K培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜?;灰翰⒓觳橄赴芏取?/span>
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
公司细胞现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
产品名称
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规格
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型号
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B16-F1 (小鼠黑色素瘤细胞)
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1×10?cells/T25培养瓶
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GOY-01X0316
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冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验事项:
1. 试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
2. 加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。
5. 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。
质量规格:>99%,BRtertButylisocyanide,98%
质量规格:>800μg/mg,USPBenzenesulfonylisocyanate,95%
质量规格:效价测定1Bromo4tertbutylbenzene,≥97.0%
质量规格:HPLC≥98%,标准品Butylisothiocyanate,99%
质量规格:HPLC≥98%,标准品3',3'',5',5''Tetrabromophenolphthalei...
质量规格:HPLC≥98%,标准品1,2Bis(2,3,4,5,6pentabromophenyl)eth...
质量规格:HPLC≥98%,标准品tertButylperoxybenzoate,98%
质量规格:HPLC≥99%,标准品1,2,4,5Tetrabromobenzene,97%
质量规格:HPLC≥98%,标准品Bromocyclopropane,99%
质量规格:>95%,美国进口原装Ethylptolylacetate,98%
质量规格:HPLC≥99.5%,标准品Dimethylterephthalate,≥99.0%
质量规格:HPLC≥98%,标准品Ethyl4pyridylacetate,97%
质量规格:HPLC≥98%,标准品1,2,3,4Tetrafluorobenzene,99%
质量规格:>98%,混旋Methylstearate,99%
质量规格:>98%1,2,4,5Tetrafluorobenzene,≥99%
利血平 50555 特价促销 规格: 20mg
三颗针对照药材 特价促销 规格: 1g
獐牙菜苦苷 17388395 特价促销 规格: 20mg
麦冬皂苷C 911819084 特价促销 规格: 10mg
白蜡树素 6035490 特价促销 规格: 10mg
银杏内J 107438799 特价促销 规格: 20mg
苍术素 特价促销 规格: 20mg
香蜂草苷 14259473 特价促销 规格: 20mg
人参皂苷Rb1 41753439 特价促销 规格: 20mg
轮环藤碱 518945 特价促销 规格: 10mg
鲁斯可皂苷元 472117 特价促销 规格: 20mg
木通苷B 105471985 特价促销 规格: 10mg
橙黄决明素 67979253 特价促销 规格: 20mg
血竭素 400603954 特价促销 规格: 20mg
邻氧桂 1533716 特价促销 规格: 20mg
B16-F1 (小鼠黑色素瘤细胞)COMTD1/AVSD2 富含半胱氨酸与表皮生因子样蛋白2抗体 规格: 0.2ml
DBC2 基因删除蛋白2抗体 规格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗人IgM 规格: 0.1ml
CDAN1 先天性红细胞**异常性贫蛋白1抗体 规格: 0.2ml
MIP-1 Beta/CCL4 巨噬细胞症因子1β 抗体 MIP-1β 规格: 0.1ml
GM-CSF 粒细胞-巨噬细胞克隆刺激因子抗体 规格: 0.1ml
CD31/PECAM-1 小板内皮细胞黏附分子-1抗体 规格: 0.1ml
Goat Anti-human IgG/Cy5 Cy5标记的羊抗人IgG 规格: 0.1ml
TUSC2 小板源性生因子A相关蛋白2抗体 规格: 0.2ml
MtTF1 线粒体转录因子1抗体 规格: 0.2ml