培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。      
    1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
    2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
    3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
   1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
   2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
   3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

细胞培养方法：

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

重水,氘(0.6ml*10) 质量规格：>99%,USP,BR Carisoprodol

重水,氘(0.55ml*10) 质量规格：HPLC>98%,标准品 Carisoprodol

重水 99.8原子%D 质量规格：> 99%,EP Carvedilol

重楼皂苷VII（标准品） 质量规格：HPLC>98%,标准品 Carvedilol

重楼皂苷VI（标准品） 质量规格：含量> 99% Cediranib

重楼皂苷II（标准品） 质量规格：含量> 99%,BR,可用于细胞培养 Celecoxib

重楼皂苷I（标准品） 质量规格：HPLC>98%,标准品 Celecoxib

重酒石长春瑞宾(标准品) 质量规格：>95%,EP,BR Chlortetracycline HCl

重酒石胆碱(>98%,BR) 质量规格：效价测定 Chlortetracycline HCl

仲辛(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 质量规格：>99%,USP34 Cilostazol

RNasefree 化溶液,10MAcetate Buffer，1M,pH5.5  1 管

RNasefree PVP K30溶液,20%Acetonitrile1 管

RNasefree Sarkosyl溶液,10%Acetosyringone1 管

RNasefree SDS溶液,10%Acetyl Coenzyme A 1 管

RNasefree 钠,3M,pH 5.2Acetylcholine Chloride1 管

RNasefree Tris HCl,1M,pH 6.5AcetyLCystein1 管

RNasefree Tris HCl,1M,pH 7.0AcetylDGlucosamine1 管

RNasefree Tris HCl,1M,pH 7.5Acetylsalicylic Acid1 管

RNasefree Tris HCl,1M,pH 8.0ACHN1 管

RNasefree Tris HCl,1M,pH 8.5Acidic Phenol1 管

RNasefree Tris HCl,1M,pH 9.0AcidWashed Glassbeads1 管

RNA级CTAB (十六基三基化铵)Acridine Orange1 管

RNA级DEPC (焦二酯)Acryl DNADOWN1 管

RNA级DTT (二代苏糖)Acrylamide1 管

RNA级EDTA·2Na (二四二钠) Acrylamide Solution（19:1Po`wder）,EG1 管

人参皂甙 Rb3   68406268

Ginsenoside Rb3   特价促销     分子式：C53H90O22  分子量：1079.27

人参皂甙 RB3备注：

人参皂甙 RB2   11021139

GINSENOSIDE RB2   特价促销     分子式：C53H90O22  分子量：1079.27

人参皂苷 RB2,人参皂苷RB2备注：

人参皂苷 Rb1   41753439

Ginsenoside Rb1   特价促销     分子式：C54H92O23  分子量：1109.29

人参皂甙 Rb1 人参皂甙备注：

拟人参皂苷 F11   69884000

(3b,6a,12b,24R)20,24Epoxy3,12,25   特价促销     分子式：C42H72O14  分子量：801.01

LN229 (人大脑神经母瘤细胞) 脉冲凝胶电泳DNA产物酶切试剂盒 20次

荧光定量检测试剂盒

等电聚焦蛋白电泳（IEF）强化补水缓冲液50毫升

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