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HLE (人肝癌细胞(未分化))

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产品名称: HLE (人肝癌细胞(未分化))
产品型号: GOY-01X0637
产品展商: 谷研
产品文档: 无相关文档
发布时间:2023-02-10

简单介绍

HLE (人肝癌细胞(未分化))在实验过程中,根据要求可始终保持HLE (人肝癌细胞(未分化))活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括HLE (人肝癌细胞(未分化))的形态、结构、生命活动等。


HLE (人肝癌细胞(未分化))  的详细介绍

下列是产品的订购信息:

产品名称

规格

型号

HLE (人肝癌细胞(未分化))

1×10?cells/T25培养瓶

GOY-01X0637

细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
    2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
    3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
   1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
   2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
   3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

25mL Agarose Gel Loading Buffer-Glycero (甘油型上样液),6X    Agarose Gel Loading Buffer-Glycero ,6X    常温保存

10mL DNA上样液 (红色),6×(非甘油) DNAON  4℃保存

2 ug pGL4.17[luc2/Neo] pGL4.17[luc2/Neo] 低温运输,-20℃保存

***检定培养基1号(低pH) AntibioticAgar  250g

1瓶 CRT细胞株 CRT 低温运输和保存

TCBS琼脂平板(9cm) Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar 10个/包

100mg 辣根过氧化物,偶联级 Horseradish Peroxidase,Conjugation Grade -20℃保存

250mL PIPES Buffer,1.0M, pH6.8  PIPES Buffer,1.0M, pH6.8  常温保存

100mL 酵母生产及产孢培养基 Growth and Sporulation Medium 常温

2 ug pPICZ C pPICZ C 低温运输,-20℃保存

乳糖(脑膜炎奈瑟氏菌专用)  20ml/支

2 ug pBudCE4.1 pBudCE4.1 低温运输,-20℃保存

嗜盐菌选择性琼脂 Halophilic Bacteria Selective Agar 250g

1g 肝素锂 Heparin Lithium Salt  室温保存

HLE (人肝癌细胞(未分化))pSHUTTLE+目的基因腺病毒穿梭载体

细胞ERK蛋白表达荧光定量检测试剂盒 10/50 次

动物组织石蜡切片糖蛋白高碘酸希尔(PAS)法50次

植物ATP生物发光法定量检测试剂盒 50次

C. tropicalis RFLP基因分析试剂盒 20次

CY3蛋白标记试剂盒 3次(200微克/次)

内切核酸酶III处理DNA损伤彗星荧光检测试剂盒 20次

优球蛋白溶解时间(ELT)检测试剂盒 20次

定性基因检测试剂盒

通用型维生素A高效液相色谱法定量检测试剂盒 20次

石蜡切片组织CASPASE-7蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 10/20次

冰冻切片DNA分离试剂盒 50次

 

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