细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备F-12K培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
公司细胞现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
|
产品名称
|
规格
|
型号
|
|
PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]（杂交瘤细胞CD25)
|
1×10?cells/T25培养瓶
|
GOY-01X0646
|
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验事项：
1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5. 试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。
50T 肠道腺病毒41型PCR检测试剂盒 低温运输，-20℃保存
250mL Tricine-SDS-PAGE配胶液 Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer 常温保存
2 ug pYES2/CT/α-Factor pYES2/CT/α-Factor 低温运输，-20℃保存
50次 一步式**DNAout One-Step Bacterial DNAOUT 常温保存(需要-20℃保存)
2 ug pET-17xb pET-17xb 低温运输，-20℃保存
FB1（Half-Fraser）添加剂（A、B） FB1 additive(A、B) 2ml*40
1瓶 293T细胞株 293T 低温运输和保存
100支 1000 μL RNase-free 蓝吸头（盒装已**） 常温
100次 神经检测试剂盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存
100mL MES Buffer,0.5M,pH6.5 MES Buffer,0.5M,pH6.5 常温保存
100次 动物种属鉴定PCR Mix 6（ITS1-5.8S-ITS2区) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
2 ug pMA5 pMA5 低温运输，-20℃保存
半稀释液 Cysteine Diluent 250g
1瓶 RAG细胞株 RAG 低温运输和保存
PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]（杂交瘤细胞CD25)糖蛋白电泳高碘酸希尔（PAS）法5次
组织维生素A高效液相色谱法定量检测试剂盒 20次
精子活力和顶体反应三色（triple staining）染色试剂盒 50次
石蜡切片组织VEGF蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 10/20次
细胞培养基L-天门冬酰胺酶偶联反应比色法定量检测试剂盒 20次
基因检测试剂盒
冰冻切片组织COLLAGEN II蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 10/20次
动物软组织可溶性膜蛋白（纯提）制备试剂盒 20次
纯化线粒体细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒 20次
核酸氧化8-氧脱氧鸟苷（8-oxo-dG）高效液相色谱（HPLC）分析试剂盒 20次
肉类L－乳酸比色法定量检测试剂盒 20次
食物维生素A含量比色法定量检测试剂盒 20次